胚性幹細胞(ES細胞)は、胚盤胞の内部細胞塊に由来する多能性細胞である。この幹細胞は、胚盤胞に再移植しても、すべての細胞系譜に分化する能力を失うことなく、試験管内で長期間維持することができる。ES細胞は試験管内で、神経細胞、筋肉、内皮細胞、造血前駆細胞を含む様々な細胞型に分化することができる。一般的な培養条件は確立されており、通常、ES細胞は不活性フィーダー細胞層上、または基底膜成分(マトリゲル、フィブロネクチン、ラミニン)を用いて培養することが必要です。ES細胞を培養する際、最も重要なパラメータの一つは、細胞を未分化の状態に維持することです。ES細胞の培養に使用する前に、血清の事前スクリーニングは不可欠です。MEFをフィーダー層として使用したヒトES細胞の増殖について、様々なロットの血清をスクリーニングしています。スクリーニングには、以下のパラメータが測定されます:
ヒトES細胞のコロニー形態
メッキ効率
分化率:未分化細胞膜に発現するヒトES細胞表面マーカーを解析(FACS解析)。
この結果は、未分化幹細胞の増殖と維持のための血清の品質の指標として使用されます。
解凍方法
血清は2~8℃で解凍することをお勧めします。ただし、必要に応じて、室温で解凍することもできます。解凍の際は、ボトルを軽く振って血清を混ぜてください。
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