MatriClone é uma nova matriz concebida para apoiar o crescimento do iPSC em fluxos de trabalho de sementeira única, mantendo a pluripotência. MatriClone está optimizado para a sementeira 'in-solution' e opticamente adequado para imagens automatizadas.
Quando utilizado como parte do protocolo de sementeira VIPS, MatriClone oferece altos níveis de sobrevivência de uma única célula e subsequente crescimento, tudo isto num fluxo de trabalho simples e automatizado que evita a necessidade de placas de revestimento. MatriClone é uma matriz definida constituída por um peptídeo recombinante e é livre de componentes animais.
Imagem do crescimento das colónias capturada no VIPS no 14º dia ilustrando o aumento do número de colónias das placas semeadas VIPS em comparação com as diluições limitadoras (LD).
Um novo padrão para o apoio ao iPSC
Porquê a necessidade de mudança? As metodologias existentes podem incluir as do MatriGel, uma mistura quimicamente indefinida segregada das células do sarcoma do rato que deve ser revestida manualmente em placas.
Muitas vezes utilizada com diluição limitada, uma abordagem estatística de baixa eficiência à sementeira de células únicas, esta abordagem é morosa e carece de provas de clonalidade.
Concebido para utilização com imagens automatizadas
MatriClone oferece a qualidade óptica ideal para contribuir para dados de alta qualidade quando imitado por plataformas de imagem automatizadas.
Isto torna o MatriClone ideal para fluxos de trabalho utilizando tecnologias de pós-semeadura, incluindo o Cell Metric®, que permite a geração de imagens de todo o poço.
Manutenção de Fenótipo, Kariótipo e Pluripotência
É importante que os clones gerados usando o fluxo de trabalho VIPS + MatriClone tenham sido demonstrados pela imunocitoquímica e cariotipagem para manter a pluripotência após pelo menos 10 passagens e tenham mantido a sua capacidade de diferenciação com sucesso.
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