deteção qualitativa do ARN do vírus 2019 em amostras do trato respiratório superior
(extractos nasofaríngeos e orofaríngeos) por sistemas de PCR em tempo real. É considerado como um auxiliar no diagnóstico da infeção pelo vírus 2019.
2. Princípio da RT-PCR em tempo real
O princípio da deteção em tempo real baseia-se no ensaio fluorogénico da 5'nuclease. Durante a reação de PCR, a DNA polimerase
cliva a sonda na extremidade 5' e separa o corante repórter do corante supressor apenas quando a sonda hibridiza com o ADN alvo.
Esta clivagem resulta no sinal fluorescente gerado pelo corante repórter clivado, que é monitorizado em tempo real pelo sistema de deteção de PCR. O ciclo de PCR no qual é inicialmente detectado um aumento do sinal de fluorescência (Ct) é proporcional à quantidade do produto específico da PCR. A monitorização das intensidades de fluorescência em tempo real permite a deteção do produto acumulado sem ter de reabrir o tubo de reação após a amplificação.
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