As células estaminais embrionárias (ES) são células pluripotentes derivadas da massa celular interna do blastocisto. As células estaminais podem ser mantidas in vitro durante períodos prolongados sem perda da sua capacidade de se diferenciarem em todas as linhagens celulares quando reimplantadas num blastocisto. As células ES podem diferenciar-se in vitro numa variedade de tipos de células, incluindo progenitores neuronais, musculares, endoteliais e hematopoiéticos. As condições gerais de cultura estão bem estabelecidas e requerem normalmente que as células ES sejam cultivadas numa camada de células de alimentação inactiva ou com componentes da membrana basal (Matrigel, Fibronectina, Laminina). Ao cultivar células ES, um dos parâmetros mais importantes é a manutenção das células no estado indiferenciado. O rastreio prévio do soro é essencial antes de o utilizar na cultura de células ES. São analisados vários lotes de soros para o crescimento de células ES humanas utilizando MEF como camada de alimentação. Os seguintes parâmetros são medidos para o rastreio:
Morfologia da colónia de células ES humanas
Eficiência de plaqueamento
Taxa de diferenciação: análise do marcador de superfície das células ES humanas expresso na membrana das células indiferenciadas (análise FACS).
Os resultados são utilizados como uma indicação da qualidade dos soros para o crescimento e manutenção de células estaminais indiferenciadas.
Descongelação
Recomendamos a descongelação do soro a 2-8ºC. No entanto, se necessário, pode descongelar o soro à temperatura ambiente. Agitar suavemente os frascos para misturar o soro durante o processo de descongelação.
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