Sonicador para biologia molecular Bioruptor® Plus

para fragmentação de DNApara fragmentação de RNA

O Bioruptor® utiliza um sistema único para processar uniformemente várias amostras em tubos selados de 0,5 ml a 50 ml de capacidade. O sistema de arrefecimento incorporado (refrigerador de água e válvula de ciclo único) assegura um controlo de temperatura de alta precisão, resultando em amostras de maior qualidade. Um excelente dispositivo para o corte de cromatina, rutura de células e tecidos e muitas outras aplicações (ver abaixo). Para acelerar a fenotipagem em grande escala da diferença do número de pólen na família Arabidopsis, modificámos um método existente mais adequado para o nosso objetivo de contagem de pólen utilizando um Bioruptor®. Cultivámos quatro plantas por genótipo. Três botões florais por planta foram colhidos e secos a 65°C durante a noite. Recolhemos botões florais com pólen maduro, mas antes de as anteras estarem abertas (fase 13 da flor). Não utilizámos a primeira e a segunda flores da inflorescência, uma vez que estas tendem a apresentar morfologias florais imaturas em termos de desenvolvimento. adicionam-se 30 μl de 5% de Tween-20 à flor seca e as amostras são submetidas a ultra-sons utilizando o Bioruptor® Plus com o modo de alta potência durante 10 ciclos (ciclo de ultra-sons: 30 segundos ON, 30 segundos OFF) para separar os grãos de pólen das anteras. Em seguida, todas as soluções de pólen são medidas com um contador de células.