Reagente em solução NI™

albumina de soro bovinode laboratóriode proteínas

Protocols.io fornece uma versão interactiva deste protocolo, onde pode descobrir e partilhar optimizações com a comunidade de investigação. Um ensaio colorimétrico de proteínas altamente sensível que supera a interferência de agentes laboratoriais comuns presentes em soluções proteicas e apresenta uma variação mínima de proteína para proteína. O ensaio não é afetado pela presença de agentes laboratoriais comuns, tais como agentes redutores, agentes quelantes, detergentes, aminas, açúcares, chaotropos, sais, fármacos, antibióticos, cobalto e outros agentes laboratoriais comuns (ver quadros 1 e 2). O NI™ Protein Assay é composto por dois passos simples: O Agente Precipitante de Proteína Universal (UPPA™) é adicionado às soluções proteicas para precipitar rapidamente a proteína total. A proteína é imobilizada por centrifugação e os agentes interferentes no sobrenadante são eliminados. A concentração da proteína é avaliada misturando-a com uma solução alcalina que contém uma concentração conhecida de sal de cobre; os iões de cobre ligam-se à espinha dorsal do péptido e o ensaio mede os iões de cobre não ligados (ver figura 2). O ensaio é independente das cadeias laterais da proteína, minimizando a variação de proteína para proteína (ver figura 3). A densidade da cor é inversamente proporcional à quantidade de proteína. O ensaio é fornecido com um padrão tradicional de proteína de albumina de soro bovino (BSA) ou com um padrão de proteína não animal. Características Resposta linear 0,5µg-50µg de proteína Necessidade de amostras pequenas, apenas 1-50µl Não é afetado por produtos químicos e agentes não proteicos Tempo de protocolo: ~30 minutos Longa vida útil Aplicações Estimativa de proteínas durante a purificação de proteínas, eletroforese, biologia celular, biologia molecular e outras aplicações de investigação.