Kit de reagentes em solução 2-D Quant

corantepara eletroforesepara concentração de proteínas

2-D Quant Kit foi concebido para a determinação exacta da concentração de proteínas em amostras preparadas para técnicas de eletroforese, tais como eletroforese 2-D, SDS-PAGE ou IEF. Visão geral o kit 2-D Quant foi concebido para a determinação exacta da concentração de proteínas em amostras preparadas para técnicas de eletroforese, tais como eletroforese 2-D, SDS-PAGE ou IEF. Determina com exatidão a concentração de proteínas na presença de 2% de SDS, 1% de DTT, 8 M de ureia, 2 M de tioureia, 4% de CHAPS, 2% de Pharmalyte e 2% de tampão IPG. Precipita quantitativamente as proteínas, deixando para trás as substâncias interferentes. Resposta linear no intervalo de 0 a 50 μg de proteína, com volumes de amostra recomendados de 1 a 50 μl. Os métodos espectrofotométricos comuns de quantificação de proteínas baseiam-se na ligação do corante Coomassie ou na redução catalisada por proteínas do ião cúprico (Cu2+) para ião cuproso (Cu+). Os ensaios de ligação ao corante não podem ser utilizados na presença de qualquer reagente que também se ligue ao corante. Isto inclui anfólitos transportadores e detergentes como PlusOne CHAPS, SDS e Triton X-100. Os ensaios que dependem da redução do ião cúprico não podem ser utilizados na presença de redutores, como o DTT, ou na presença de reagentes que formam complexos com o ião cúprico, como a tioureia ou o EDTA. O procedimento do kit 2-D Quant funciona através da precipitação quantitativa das proteínas, deixando para trás as substâncias interferentes. O ensaio baseia-se na ligação específica dos iões de cobre às proteínas. As proteínas precipitadas são ressuspensas numa solução contendo cobre e o cobre não ligado é medido com um agente colorimétrico. A absorvância a 480 nm está inversamente relacionada com a concentração proteica.