Kit de reagentes em solução E.Z.N.A.®

para PCRNGSpara ácidos nucleicos

Isolar até 200 µg de ADN plasmídico com baixo teor de endotoxinas (<1EU/µg) de grau de transfecção a partir de 15-50 mL de culturas bacterianas, utilizando filtros de seringa para a eliminação de lisados e colunas de centrifugação midi Visão geral O E.Z.N.A.® Endo-Free Plasmid Midi Kit fornece um método eficiente para o isolamento em larga escala de DNA de plasmídeo com baixa endotoxina. O sistema utiliza seringas de filtro de limpeza do lisado em vez de centrifugação para limpar rapidamente os lisados bacterianos após a lise alcalina. Após a depuração do lisado, as endotoxinas são removidas e o protocolo segue um procedimento simples de "lavagem e eluição" para obter ADN plasmídico de alta qualidade. Os rendimentos variam de acordo com o número de cópias do plasmídeo, a estirpe de E. coli e as condições de crescimento. 15-50 mL de culturas bacterianas em meio LB produzem normalmente até 200 µg de ADN plasmídico com elevado número de cópias. Podem ser processados até 100 ml de cultura quando se trabalha com plasmídeo de baixo número de cópias. O sistema utiliza a tecnologia de centrifugação ou de vácuo para a purificação de plasmídeos e elimina as demoradas colunas de fluxo por gravidade que requerem a precipitação de álcool. O ADN plasmídico purificado é adequado para aplicações sensíveis a jusante, tais como transfecção de células de mamíferos, clonagem, sequenciação automática de ADN fluorescente (as leituras típicas excedem 800 pb), sequenciação de nova geração, digestão por enzimas de restrição, ligação, PCR, transcrição in vitro, transformação, etc. Rápido - Purificação de ADN plasmídico em menos de 45 minutos Seguro - Sem extracções de fenol/clorofórmio Versátil - Disponível nos formatos de centrifugação e vácuo Alta qualidade - ADN plasmídico de grau de transfecção, com baixo teor de endotoxinas (< 1 UE/µg) Especificações Não se destina a ser utilizado em procedimentos de diagnóstico.