Kit de reagentes corante

para citologiapara análise de esperma

Este método é modificado da coloração Diff-Quick e Wright-Giemsa recomendada pela OMS. Destina-se ao exame de coloração da morfologia dos espermatozóides, à citologia dos espermatozóides e à citologia da próstata. Princípio: As proteínas com diferentes pontos isoeléctricos no espermatozoide e nas células têm cargas diferentes sob o mesmo pH e, assim, ligam-se seletivamente a diferentes corantes. Os amidos libertados das proteínas acidófilas têm cargas positivas e ligam-se ao corante ácido (eosina), tornando-se vermelhos. Os carboxilos libertados pelas proteínas basófilas têm cargas negativas e ligam-se ao corante alcalino (azul de metileno), tornando-se azuis. As proteínas dos neutrófilos, cujas cargas positivas dos amidos libertados são equivalentes às cargas negativas dos carboxilos libertados, ligam-se simultaneamente ao corante ácido e ao corante alcalino, ficando com uma coloração lilás. No entanto, como as cargas libertadas são iguais, a coloração é fraca. O tampão pode evitar a interferência de substâncias ácidas e alcalinas para um resultado satisfatório. Métodos: Centrifugar o esperma liquefeito durante 8 minutos (500 rpm) e remover o sobrenadante. Lavar o precipitado com solução salina isotónica 2~3 vezes durante 5 minutos cada (2.000 rpm). Para a amostra com muitos espermatozóides, retirar os espermatozóides liquefeitos do fundo do tubo, lavar e centrifugar com solução salina isotónica 2 a 3 vezes. Adicionar solução salina isotónica para ressuspender o precipitado da centrifugação após a lavagem. Empurrar para a fatia de acordo com o método de empurrar a película de sangue. Secar ao ar ou com ventilação. Cobrir o esfregaço com 1~2 gotas de corante A durante 15~20 segundos (o corante pode secar nesta altura). Lavar a mancha A com tampão fosfato M/15 e, em seguida, deitar fora o tampão por breves instantes.