2-D Quant Kitは、2次元電気泳動、SDS-PAGE、IEFなどの電気泳動技術で調製した試料中のタンパク質濃度を正確に測定するために設計されています。
2%SDS、1%DTT、8M尿素、2Mチオ尿素、4%CHAPS、2%Pharmalyte、2%IPG Bufferの存在下で、タンパク質濃度を正確に測定します。
タンパク質を定量的に沈殿させ、妨害物質を残します。
0~50μgのタンパク質で直線的な応答が得られ、推奨サンプル量は1~50μlです。
一般的な分光光度法は、クマシー色素の結合、またはタンパク質触媒による銅(Cu2+)イオンの亜銅(Cu+)イオンへの還元に依存してタンパク質を定量する方法である。色素結合アッセイは、色素と結合する試薬の存在下では使用できない。これには、キャリアー両性溶媒や、PlusOne CHAPS、SDS、Triton X-100のようなデタージェントが含まれます。銅イオンの還元に依存するアッセイは、DTTなどの還元剤、チオ尿素やEDTAなどの銅イオンと複合体を形成する試薬の存在下では使用できません。
2-D Quant Kitの手順は、干渉物質を残してタンパク質を定量的に沈殿させることで機能します。本アッセイは、銅イオンとタンパク質の特異的な結合に基づいています。沈殿したタンパク質は銅を含む溶液に再懸濁され、結合していない銅は比色剤で測定されます。480 nmの吸光度はタンパク質濃度に反比例する。
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