O kit HTRF human IL1 alpha foi concebido para a quantificação da libertação de IL1 alpha humana no sobrenadante celular.
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Também conhecida como hematopoietina 1, a IL1 alfa é uma citocina pró-inflamatória produzida principalmente por macrófagos activados e células epiliais e endoliais. O seu principal papel é a manutenção e proteção da função de barreira da pele. Em resposta à infeção, a IL1 alfa estimula a proliferação de fibroblastos, aumenta os neutrófilos no sangue e ativa a proliferação de linfócitos.
A avaliação de amostras de soro requer frequentemente uma maior sensibilidade. Em alguns casos, os ensaios AlphaLISA podem ter sensibilidade suficiente para permitir a deteção de níveis baixos de analitos no soro ou plasma.
Os ensaios HTRF oferecem muitas vantagens em relação a outras tecnologias:
Formato homogéneo de adição e leitura
Sem etapas de lavagem
Baixo nível de fundo
Miniaturização direta de microplacas de 96 ou 384 poços para ensaios de alta densidade
de alta densidade, tais como placas de baixo volume de 384 poços e de 1536 poços
Sinal estável, proporcionando flexibilidade no tempo de leitura ou no tamanho dos ensaios
Princípio do ensaio
O sobrenadante celular, a amostra ou o padrão são dispensados diretamente na placa de ensaio para a deteção por reagentes HTRF® (placa branca de baixo volume de 384 poços ou placa Revvity de baixo volume de 96 poços em 20 µl). Os anticorpos marcados com o dador e o aceitador HTRF são pré-misturados e adicionados num único passo de dispensa, para simplificar ainda mais o procedimento do ensaio. O ensaio pode ser executado até um formato de 1536 poços, redimensionando simplesmente cada volume de adição proporcionalmente.
Análise de dados do ensaio
A curva logística de 4 parâmetros (4PL) é geralmente recomendada para ajustar uma curva padrão ELISA.
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