Kit de teste para pesquisa HTRF

de célulasde sorode plasma

O HTRF Human IFN-β Detection Kit é um imunoensaio concebido para a deteção e quantificação de IFN-β humano em sobrenadantes de células, num formato homogéneo (sem etapas de lavagem, sem etapas de separação). Descrição geral Os interferões de tipo I, interferão alfa (IFN-α) e interferão beta (IFN-β), desempenham papéis essenciais na resposta imunitária inata a infecções virais. O IFN-β é produzido por fibroblastos, macrófagos e células dendríticas, bem como por células endoliais. A expressão do gene do IFN-β é controlada por factores de transcrição como o IRF-3, c-Jun/ATF-2 e NF-kappaB a jusante dos receptores de reconhecimento de padrões, como os receptores do tipo Toll. Em particular, o IFN-β é a principal leitura funcional da ativação da via cGas-cGAMP-STING. Uma vez segregado, o IFN-β liga-se e ativa o complexo de receptores IFNAR1/IFNAR2, que depende dos factores de transcrição STAT1/2. A fosforilação do STAT1/2 leva à indução da expressão de genes anti-virais. A avaliação de amostras de soro exige frequentemente uma sensibilidade acrescida. Em alguns casos, os ensaios AlphaLISA podem ter sensibilidade suficiente para permitir a deteção de níveis baixos de analitos no soro ou plasma. Princípio do ensaio O sobrenadante celular, a amostra ou o padrão são dispensados diretamente na placa de ensaio para deteção por reagentes HTRF® (placa branca de baixo volume de 384 poços ou placa Revvity de baixo volume de 96 poços em 20 µL). Os anticorpos marcados com o dador e o aceitador HTRF são pré-misturados e adicionados num único passo de dispensa, para simplificar ainda mais o procedimento de ensaio. O ensaio pode ser executado até um formato de 1536 poços, redimensionando simplesmente cada volume de adição proporcionalmente. Análise de dados do ensaio A curva logística de 4 parâmetros (4PL) é geralmente recomendada para ajustar uma curva padrão ELISA.