Kit de reagentes em solução 63 series

para PCR em tempo realpara ácidos nucleicosde fosfato

As medições dos níveis de expressão do mRNA - quer por análise do Norte, protecção de ribonuclease, ou PCR quantitativa em tempo real - são geralmente padronizadas através da comparação dos dados com os obtidos para um gene de referência interno ou endógeno. Genes domésticos como a beta-actina e a gliceraldeído-3-fosfato desidrogenase (GAPDH) são mais frequentemente utilizados porque se espera que os seus níveis de expressão se mantenham constantes sob diferentes condições de tratamento. Infelizmente, esta suposição nem sempre é válida, e os resultados baseados apenas nos genes domésticos podem ser tendenciosos (Suzuki, Higgins, e Crawford 2000). Um método melhor é normalizar os seus dados utilizando o nosso qPCR Human Reference cDNA, o único controlo de cDNA derivado inteiramente de tecidos humanos. qPCR Human Reference cDNA é o controlo ideal para comparar dados de diferentes experiências de PCR quantitativa (qPCR). Uma vez que é preparado a partir de um pool total de RNA recolhido de vários tecidos diferentes, o nosso cDNA qPCR Referência Humana fornece uma ampla cobertura genética, como demonstrado pela análise de microarranjos do material de base do RNA. O RNA, e portanto o cDNA, preparado a partir de tecidos inteiros fornece uma melhor representação genética com menos variação do que o RNA feito a partir de linhas celulares (dados não mostrados). Além disso, a análise por PCR mostra que o nosso RNA total está virtualmente livre de ADN genómico. Isto permite uma medição mais precisa do número de cópias transcritas. Tanto os genes de alta como de baixa abundância estão bem representados, permitindo a preparação de uma vasta gama de padrões serialmente diluídos para cada ensaio de qPCR. A variação lote a lote do cDNA de referência é mínima porque a fonte de RNA é preparada em escala industrial. Visão geral Ampla cobertura genética Virtualmente livre de ADN genómico