Kit de reagentes em solução CellAmp™ Whole

para pesquisapara PCRpara ácidos nucleicos

O CellAmp Whole Transcriptome Amplification Kit (Real Time), Ver. 2 permite-lhe passar de células a cDNA pronto para análise por PCR em tempo real. Quando se utilizam técnicas convencionais para trabalhar com quantidades vestigiais de ácidos nucleicos, a perda de produto durante as etapas de purificação é um problema frequente. No entanto, este kit de células para cDNA garante um bom rendimento do produto, uma vez que não são necessários passos de purificação de RNA e cDNA que induzam perdas. O procedimento começa com a lise das células, seguida de uma reação de transcrição inversa com o iniciador adaptador dT (RT dT Primer 2) para sintetizar o cADN a partir do ARNm. Em seguida, é utilizada a desoxinucleotidil transferase terminal (TdT) para adicionar uma cauda dA ao cADN sintetizado. O produto de cADN resultante com uma cauda 3' dA é utilizado como modelo direto para a PCR, o que resulta num menor número de ciclos de amplificação necessários. Para além de passar das células para o cADN, este produto pode ser utilizado para amplificar o cADN a partir de quantidades vestigiais de ARN. O CellAmp Whole Transcriptome Amplification Kit (Real Time), Ver. 2 utiliza um passo adicional de tratamento com exonuclease I, que ajuda a suprimir a amplificação não específica derivada do iniciador e aumenta o rendimento de genes pouco expressos O CellAmp Whole Transcriptome Amplification Kit (Real Time) Ver. 2 permite a amplificação direta de cDNA a partir de um pequeno número de células. O cDNA amplificado pode ser utilizado como modelo para PCR em tempo real. Quando se utilizam técnicas convencionais para trabalhar com quantidades vestigiais de ácidos nucleicos, a perda de ácido nucleico durante os passos de purificação é um problema frequente. No entanto, este kit proporciona um bom rendimento porque não são necessários passos de purificação do ARN e do ADNc que induzam perdas.