O CellAmp Whole Transcriptome Amplification Kit (Tempo Real), Ver. 2 permite passar de células para cDNA que está pronto para análise por PCR em tempo real. Ao utilizar técnicas convencionais para trabalhar com quantidades vestigiais de ácidos nucleicos, a perda do produto durante as etapas de purificação é um problema frequente. No entanto, este kit de células para cDNA assegura um bom rendimento do produto porque as etapas de purificação indutoras de perdas de RNA e cDNA não são necessárias.
O procedimento começa com a lise celular, seguida por uma reacção de transcrição inversa com o primer adaptador dT (RT dT Primer 2) para sintetizar o cDNA a partir do mRNA. Em seguida, a transferência de desoxinucleótidotidil terminal (TdT) é utilizada para adicionar uma cauda dA ao cDNA sintetizado. A cauda 3' dA resultante contendo cDNA é utilizada como modelo directo para PCR, resultando em menos ciclos de amplificação necessários.
Além de passar de células para cDNA, este produto pode ser utilizado para amplificar o cDNA a partir de quantidades vestigiais de RNA.
O CellAmp Whole Transcriptome Amplification Kit (Tempo Real), Ver. 2 utiliza uma etapa adicional de tratamento exonuclease I, que ajuda a suprimir a amplificação não específica derivada de primers e aumenta a produção de genes de baixa expressão.
Células para cDNA: Kit de amplificação de transcriptoma completo CellAmp para RT-PCR
O CellAmp Whole Transcriptome Amplification Kit (Tempo Real), Ver. 2 permite passar de células para cDNA que está pronto para análise por PCR em tempo real.
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