Para a determinação quantitativa da lipase no soro ou no plasma. Apenas para utilização em diagnóstico in vitro.
HISTORIAL DO MÉTODO
Este método baseia-se na clivagem de um substrato cromogénico específico de lipase, o éster do ácido 1,2-O-dilauril-rac-glicero-3-glutárico-(6-metilresorufina), emulsionado com ácidos biliares. A actividade enzimática pancreática é determinada especificamente pela combinação de ácido biliar e colipase utilizada neste ensaio. Não é detectada praticamente nenhuma actividade de lipase na ausência de colipase. A colipase apenas activa a lipase pancreática, mas não outras enzimas lipolíticas presentes no soro. A elevada quantidade de colatos garante que as esterases presentes no soro não reagem com o substrato cromogénico devido à carga superficial altamente negativa.
PRINCÍPIO
A pH alcalino, o substrato corante da lipase 1,2-O-dilauril-rac -glicerol - 3 - ácido glutárico - ( 6 -metil - resorufina) - éster é clivado pela acção catalítica da lipase pancreática, formando 1,2-O-dilauril-rac-glicerol e o composto instável ácido glutárico-(6-metil-resorufina) - éster. Na solução alcalina, este composto degrada-se em ácido glutárico e metilresorufina. A intensidade da cor vermelha formada é directamente proporcional à actividade da lipase. Esta actividade pode ser medida a 578 nm.
PRECAUÇÕES
1. Os reagentes contêm azida de sódio a 0,09%.
2. Manusear com cuidado. A eliminação dos resíduos deve ser efectuada de acordo com os regulamentos locais legais.
Concentrações de Hemoglobina superiores a 400 mg/dL e de Bilirrubina superiores a 60 mg/dL podem interferir com o ensaio. Para efectuar este teste, recomenda-se vivamente a utilização de material de laboratório descartável.
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