Reagente solução de coloração Von Kossa

para citologiapara histologia

Produto para a preparação de amostras cito-histológicas para microscopia ótica. Para demonstrar depósitos de iões de cálcio em secções de tecidos. PRINCÍPIO Este método baseia-se numa reação de substituição. Os tecidos são tratados com uma solução de nitrato de prata; a prata catiónica substitui o cálcio no sal original, formando assim um sal de prata que pode ser mostrado por redução a prata metálica. A reação é a seguinte: CaCO3 + AgNO3 = Ag2CO3 + Ca(NO3)2 Ag2CO3 + 2H + = 2Ag + H2O + CO2 Os sais de cálcio susceptíveis de reagir com o nitrato de prata são o carbonato, o fosfato, o oxalato, o sulfato, o urato, o cloreto e o sulfocianeto. Dado que o cálcio está presente nos tecidos dos mamíferos essencialmente sob a forma de carbonato e fosfato de cálcio, este método é adequado para o detetar. Para evitar falsos resultados devidos à presença de ácido úrico e de uratos nos tecidos, estes sais foram solubilizados numa solução saturada de carbonato de lítio. MÉTODO 1) Colocar a secção em água destilada. 2) Deitar na secção 10 gotas do reagente A: deixar atuar durante 10 minutos. 3) Enxaguar bem em água destilada. 4) Deitar na secção 10 gotas do reagente B: deixar atuar no escuro durante 1 hora. 5) Enxaguar bem em água destilada. 6) Deitar na secção 10 gotas de água destilada e adicionar 10 gotas de reagente C: deixar atuar durante 5 minutos (até que os sais de prata se tornem negros). 7) Enxaguar em água destilada. 8) Deitar na secção 10 gotas do reagente D: deixar atuar durante 5 minutos. 9) Lavar com água destilada. 10) Deite na secção 10 gotas do reagente E: deixe atuar durante 5 minutos. 11) Lavar com água destilada e desidratar através de álcoois ascendentes, limpar em xileno e montar.