Reagente solução de coloração 30-30118LY

para histologia

Produto para a preparação de amostras cito-histológicas para microscopia ótica. Aplicação Secções criostáticas de 8 microns de músculo esquelético humano. Para evidenciar a atividade enzimática da fosfatase ácida. A fosfatase ácida encontra-se no macrófago e no lisossoma, identifica a necrose e a regeneração. Resultados principais O fosfato ácido de naftol é hidrolisado por fosfatases ácidas presentes no tecido, sendo produzidos derivados de naftol. Os derivados do naftol ligam-se a um sal de diazónio instável, a hexazónio pararosanilina, para produzir um corante azo vermelho para marcar os locais de atividade enzimática. Método 1) Recomenda-se que os reagentes atinjam a temperatura ambiente antes de iniciar o procedimento. 2) Secção em fixador para fosfatase ácida (código Bio-Optica 30-30120), 10 minutos 3) Secar ao ar, 10 minutos 4) Preparação da solução de incubação: - adicionar o reagente B ao reagente C. Agitar 5-10 segundos e deixar repousar durante 1 minuto. - colocar o conteúdo do tubo A no reagente D. Agitar 5-10 segundos. - adicionar a solução B+C à solução A+D. Agitar 5-10 segundos. 5) Incubar as secções a 37°C, 45 minutos. 6) Enxaguar em água destilada, 10 minutos 7) Verde de metilo (código Bio-Optica 30-30119), 5 minutos 8) Enxaguamento em água destilada 9) Montar em meios de montagem aquosos. Em alternativa, desidratar rapidamente através de álcoois até xileno e montar em meios de montagem resinosos. Atividade enzimática da fosfatase ácida positiva: vermelho Resultados Fundo e núcleo: verde