プロテイナーゼK試薬 N9016

プロテアーゼ希釈バッファー研究用

プロティナーゼKは脂肪性の、芳香または疎水性アミノ酸のカルボキシル基の側面でペプチド結合を裂くendolyticプロテアーゼである。プロティナーゼKはセリーンのプロテアーゼとして分類される。この酵素が加水分解される最も小さいペプチッドはtetrapeptideである。 特徴 •組換えのプロティナーゼK •反作用プロダクトの広い範囲の能動態 適用 •培養された細胞およびティッシュからのゲノムDNAの分離 •DNAおよびRNAを隔離する場合のティッシュまたは細胞ラインからのDNasesおよびRNasesの取り外し •酵素の局在化の決定 •PCRプロダクトのクローニング効率の改善 品質管理 DNaseの活動:どれも37ºCのλ DNAとの孵化6 hrsの後の探索可能な酵素活性。 RNaseの活動:どれも25ºCのRNAとの孵化16 hrsの後の探索可能なリボヌクレアーゼの活動。 源 遺伝的に符号化するクローンとして作られた遺伝子が付いているイースト菌からEngyodontiumのアルバム（Tritirachiumのアルバム） endolyticプロテアーゼを設計した。 活動単位の定義 酵素の1単位は37°Cで1分、基質として変化させたヘモグロビンを使用してpH 7.5の1 µmolのチロシンに相当してFolin肯定的なアミノ酸およびペプチッドを解放する。 酵素活性は次の混合物で試金される:0.08 Mのカリウムの隣酸塩（pH 7.5）、5つのMの尿素、NaCl 4つのmMの、CaCl 3つのmMの2つそして16.7 mg/mlヘモグロビン。 準備の指示 貯蔵液は希薄の緩衝[20のmM Tris HCl （pH 7.4）、CaCl 1つのmMの2]の40-80mg/mlとしてまたは[20のmM Tris HCl （pH 7.4）、CaCl 1つのmMの2、2%のグリセロール]準備され、0.22μmフィルターを使用して殺菌し、50%のグリセロールの20-40mg/mlの最終的な集中で供給することができる。24ºCからの-80ºCへの広い温度較差の因数の店。 低蛋白の結合が付いているPESおよびPVDFの膜は生殖不能のろ過で推薦される。