ClonExpress技術は、簡便かつ迅速で、高効率なDNAシームレスクローニング技術です。この技術により、任意のベクター内の任意の部位へインサートを方向性を持ってクローニングすることが可能になります。任意の方法でベクターを直線化し、直線化されたベクターの末端配列を、インサートの5'末端側のフォワード/リバース増幅プライマーの末端に導入することで、 これにより、PCR産物の5'末端および3'末端は、それぞれ直線化されたベクターと同じ末端配列(15~20 bp)を持つようになります。 PCR産物と直線化されたベクターを一定の比率で混合します。リコンビナーゼの触媒作用下で、37°Cで30分間形質転換を行うことで、方向性クローニングを完了させることができます。
ClonExpress IIは、新世代の組換えクローニングキットです。 独自のリガーゼ非依存型システムを採用しており、ベクターの自己リゲーションによるバックグラウンドを大幅に低減し、陽性率は95%以上に達します。高度に最適化された反応バッファーと強化型リコンビナーゼ「Exnase II」により、組換え効率と不純物に対する耐性を大幅に向上させることができます。 これらの特徴により、線状化されたベクターやインサートを精製せずに直接組換えクローニングに使用することが可能となり、実験手順が大幅に簡略化されます。
特徴
優れた性能:リガーゼ不要、自己リガーゼなし、陽性率95%以上
幅広い互換性:50 bp~10 kbのDNA断片を効率的にクローニング可能;単一断片にも適用可能
その他の特徴:インサート断片の制限酵素認識部位を考慮する必要がない
ソフトウェアサポート:オンラインプライマー設計ソフトウェア「CE Design」を提供
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