溶解液クリアランス用のシリンジフィルターとミディ・スピン・カラムを使用して、15~50 mLの細菌培養液から最大200 µgのトランスフェクション・グレード、低エンドトキシン・プラスミドDNA(<1EU/µg)を単離する
概要
E.Z.N.A.® Endo-Free Plasmid Midi Kitは、低エンドトキシンプラスミドDNAの大規模分離を効率的に行うための方法です。本システムは、遠心分離の代わりにLysate Clearance Filter Syringesを使用し、アルカリ溶解後のバクテリアライセートを迅速にクリアリングします。ライセートクリアランス後、エンドトキシンを除去し、プロトコルはシンプルな「bind-wash-elute」手順で、高品質のプラスミドDNAを提供します。収量は、プラスミドコピー数、大腸菌の菌株、増殖条件によって異なる。LB培地で15-50 mLの細菌培養を行うと、通常、最大200 µgの高コピー数のプラスミドDNAが得られる。低コピー数のプラスミドを扱う場合は、最大100 mLの培養を処理することができます。本システムは、プラスミド精製に遠心分離または真空技術を使用し、アルコール沈殿を必要とする時間のかかる重力流カラムを排除しています。精製されたプラスミドDNAは、哺乳類細胞のトランスフェクション、クローニング、自動蛍光DNAシーケンス(典型的なリードは800bpを超える)、次世代シーケンス、制限酵素消化、ライゲーション、PCR、in vitro転写、形質転換など、繊細な下流アプリケーションに適しています。
迅速 - 45分未満でプラスミドDNAを精製可能
安全性 - フェノール/クロロホルム抽出は不要です。
多用途 - スピンおよびバキュームフォーマットが利用可能
高品質 - トランスフェクショングレード、低エンドトキシンプラスミドDNA(< 1 EU/µg)
仕様
診断用には使用できません。
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