染料試薬キット

細胞学精液分析用

本法はWHOが推奨するDiff-Quick染色法およびWright-Giemsa染色法を改良したものである。精子形態学、精子細胞学および前立腺細胞学の染色検査を目的としている。 原理 精子や細胞内の等電点の異なるタンパク質は、同じpHの下で異なる電荷を帯びるため、異なる染色液に選択的に結合する。好酸性タンパク質から遊離したアミドは正の電荷を持ち、酸性染色液（エオシン）と結合して赤くなる。好塩基性タンパク質から遊離したカルボキシルは負の電荷を持ち、アルカリ性染色液（メチレンブルー）と結合して青く染まる。好中球蛋白質は、遊離したアミドによる正電荷と遊離したカルボキシルの負電荷が等価であるため、酸性染色液とアルカリ性染色液の両方に同時に結合し、紫色に見える。しかし、遊離した電荷が等しいため、染色は弱い。緩衝剤は酸とアルカリ物質の干渉を防ぎ、満足のいく結果を得ることができる。 方法 液化精子を8分間遠心分離し（500rpm）、上清を除去する。沈殿を等張食塩水で5分間ずつ2～3回洗浄する（2,000rpm）。精子が多い検体の場合は、チューブの底から液化精子を取り出し、等張食塩水で2～3回洗浄・遠心する。 洗浄後、遠心沈殿に等張食塩水を加えて懸濁する。血液フィルム押し出し法に従ってスライスに押し込む。空気中または換気しながら乾燥させる。 ステインAを1～2滴、15～20秒間塗抹標本を覆う（このときステインが乾燥することがある）。 ステインAをM/15リン酸緩衝液で洗い流し、緩衝液を簡単に捨てる。