Kit de teste de tuberculose cobas® MTB-RIF/INH

de diagnósticode Mycobacterium tuberculosisde Chlamydia trachomatis

Visão geral
cobas® MTB-RIF/INH para uso nos sistemas cobas® 5800/6800/8800 é um teste in vitro qualitativo automatizado que utiliza PCR em tempo real para a detecção direta de mutações associadas à resistência à rifampicina no gene rpoB e mutações associadas à resistência à isoniazida nos genes katG e inhA de Mycobacterium tuberculosis a partir de amostras respiratórias humanas. O teste destina-se a ser usado como ensaio reflexo em conjunto com o cobas® MTB e, em combinação com cultura e testes de sensibilidade a fármacos, como auxílio no diagnóstico de M. tuberculosis multirresistente (MDR‑TB).

Uso previsto
Para análise de expectoração bruta, e expectoração digerida/descontaminada (N‑acetil‑L‑cisteína/NaOH) e amostras de lavagem broncoalveolar (BAL) que tenham testado positivas para MTBC pelo cobas® MTB.

Princípio / Método
A liquefação e inativação microbiana são realizadas com cobas® Microbial Inactivation Solution (MIS), seguida de sonicação. Os sistemas cobas® 5800/6800/8800 executam preparação de amostras totalmente automatizada (extração e purificação de ácidos nucleicos), amplificação por PCR em tempo real, detecção e atribuição automática de resultados (positivo, negativo, inválido).

Preparação e extração da amostra
A libertação de ácidos nucleicos é obtida por disrupção química (MIS, cobas® omni Lysis Reagent), enzimática (proteinase) e física (sonicação). Os ácidos nucleicos libertados ligam‑se à superfície de sílica das partículas de vidro magnéticas adicionadas; impurezas e inibidores de PCR são removidos por etapas de lavagem e o ácido nucleico purificado é eluído a temperatura elevada.

PCR e deteção
São utilizados primers específicos do alvo para amplificação. Sondas específicas de mutação, marcadas com fluoróforos, permitem a deteção simultânea do complexo MTB, mutações de resistência à rifampicina e à isoniazida em cinco canais de deteção (as mutações de rifampicina são detetadas em três canais). O master mix contém dUTP (em vez de dTTP) e AmpErase (uracil‑DNA glycosylase) para controlar a contaminação por carry‑over. A deteção em tempo real mede a fluorescência dos reporters durante a PCR.

Alvos detectados

• Complexo MTB (alvo genómico de cópia única)
• Mutações associadas à resistência à rifampicina (gene rpoB) — 18 mutações detetadas
• Mutações associadas à resistência à isoniazida (gene katG e região promotora inhA) — 7 mutações detetadas

Instrumentos previstos / fluxo de trabalho
Destinado ao uso nos sistemas cobas® 5800, cobas® 6800 e cobas® 8800. Os sistemas fornecem manuseio automatizado de amostras, extração de ácidos nucleicos, amplificação por PCR, deteção e reporte automático de resultados.

Informação de encomenda
Número de material | Descrição do material
09040617190 | KIT COBAS 58/68/8800 MTB-RIF/INH 192T

Aviso regulatório
Para uso diagnóstico in vitro.