A coloração PAS Hepatin destina-se à coloração da hepatina. Os tecidos são oxidados em ácido periódico e a cor desenvolve-se após a adição de Fucshin incolor. Esta reação é utilizada principalmente para o exame de polioses. Para fungos e bactérias, a reação também é positiva.
Princípio:
O ácido periódico é um oxidante que pode destruir a ligação de carbono da polirose. Em primeiro lugar, os tecidos são oxidados numa solução de ácido periódico para quebrar a ligação de carbono do grupo glicol ou do hidroxilo de amoníaco na polioses dos tecidos, o que resulta na formação de um composto de aldeído. Subsequentemente, o aldeído livre exposto irá reagir com Fucshin incolor para formar um novo composto vermelho-fúcsia.
Métodos:
1. Desparafinizar as secções em água desionizada.
2. Enxaguar em água destilada durante 1~2 minutos.
3. Oxidar as secções em ácido periódico a 0,5% durante 10 minutos.
4. Enxaguar abundantemente em água destilada e secar as secções com papel absorvente.
5. Corar em reagente de Schiff (solução incolor de Fucshin) durante 10 a 15 minutos.
6. Lavar em água corrente da torneira durante 10 minutos.
7. Corar o núcleo com hematoxilina durante 1~2 minutos.
8. Desidratar com álcool a 95% e 100% e limpar com xileno.
9. Montar com meios de montagem.
Precaução:
1. Guardar a solução de Fucshin incolor no frigorífico e levá-la à temperatura ambiente antes de a utilizar. Após cada utilização, voltar a colocá-la no frasco original e guardá-la no frigorífico. Seguindo o procedimento acima descrito, a solução de Fucshin Incolor pode ser reutilizada várias vezes até aparecer a cor rosada.
2. O tempo de coloração da solução de Fucshin Incolor depende da temperatura ambiente. No verão, 10 minutos são normalmente suficientes; no inverno, contudo, deve ser prolongado até 20 minutos.
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