A coloração com Alcian blue (pH 2,5) destina-se à coloração de substâncias mucosas ácidas, à identificação de epiteliomas mucosos e de substâncias mucosas em tumores, bem como à coloração de cápsulas de Cryptococcus neoformans.
Princípio:
O azul de Alcian é o corante mais específico para a deteção de substâncias mucosas ácidas. Este corante aniónico forma uma ligação eletrovalente com o grupo ácido. O azul de Alcian pode ser utilizado para separar e identificar diferentes substâncias mucosas a vários pHs. A pH 1, o grupo sulfónico (OSO3H) é corado; e a pH 2,5, o grupo carboxilo é bem corado. A cápsula de Cryptococcus neoformans é constituída por substância mucosa e pode ser corada a azul com azul de Alcian. Os outros míldios e as suas cápsulas não podem ser corados.
Métodos:
1. Fixar os tecidos em formaldeído a 10%. Desidratar da forma habitual e incorporar.
2. Desparafinizar as secções em água desionizada.
3. Colocar em solução de Alcian blue durante 10 a 20 minutos e enxaguar brevemente com água.
4. Colocar a coloração de contraste na solução Nuclear Fast Red durante 5 a 10 minutos e enxaguar brevemente com água.
5. Desidratar da forma habitual e limpar. Montar com meios de montagem.
Precaução:
1. A solução de azul de Alcian contém 3% de ácido acético para manter o pH a 2,5. O timol é utilizado como conservante para a prevenção do míldio. A solução de azul de Alcian e a solução de Nuclear Fast Red devem ser armazenadas a 4 ℃ após a constituição.
2. A solução de Alcian blue é uma coloração forte com cor estável. O excesso de coloração não é uma preocupação, mesmo após uma coloração longa.
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