O corante Sudan Black destina-se à coloração neutra de gorduras.
Princípio:
Pensa-se que a coloração dos lípidos depende das propriedades físicas da solução ou da adsorção. Quando o corante Sudan Black é dissolvido em solventes orgânicos, apresenta uma maior solubilidade nos lípidos do tecido congelado do que nos solventes originais. Assim, durante a coloração, os corantes migram para os lípidos a partir dos solventes orgânicos, resultando na coloração dos lípidos.
Métodos:
1. Cortar tecido congelado a 6~10μm, enxaguar em água destilada.
2. Enxaguar o tecido em etanol a 50~70% durante 20~30 segundos.
3. Colocar em solução de Sudan Black B durante 3 a 5 minutos.
4. Diferenciar em etanol a 50~70% durante alguns segundos até que a cor solta nas lâminas seja removida.
5. Lavar com água destilada.
6. Corar com solução Nuclear Fast Red durante 5 minutos.
7. Enxaguar em água destilada durante 1~2 minutos.
8. Remover o excesso de água à volta da lâmina e secar ao ar.
9. Montar com arabinano ou geleia de glicerina.
Precaução:
1. Para visualizar os lípidos, corar tecido congelado em vez de tecido em parafina, uma vez que os lípidos são facilmente solúveis em solventes orgânicos.
2. O tecido congelado utilizado para a coloração de lípidos não deve ser demasiado fino. Caso contrário, o conteúdo lipídico pode perder-se.
3. A coloração não permanecerá durante muito tempo, pelo que deve ser observada e fotografada o mais rapidamente possível.
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