Kit de reagentes corante BA4090

para microbiologiade Mycobacterium tuberculosis

Este kit baseia-se no método Ziehl-Neelsen recomendado pela OMS e é uma coloração química destinada à deteção de bactérias álcool-ácido resistentes, como o Mycobacterium tuberculosis. Princípio: As bactérias ácido-resistentes, como o Mycobacterium tuberculosis e o Mycobacterium leprae, são difíceis de corar devido à sua cápsula lipoide na parede celular. No entanto, quando a cápsula lipoide é corada com um corante melhorado, como a carbolfucsina, o composto recém-formado resiste à descoloração do ácido-álcool e retém a cor original corada (vermelho), que pode ser facilmente diferenciada de outros microrganismos que ainda adsorvem a coloração azul contrária. O fenol é mordente e é capaz de melhorar a capacidade de coloração. Métodos: 1. Desparafinar o tecido, adicionar Carbolfuchsin, aquecer com uma pequena chama e manter a coloração a vapor durante 5 a 10 minutos. Evitar vaporizar para secar ou ferver. 2. Após arrefecimento, enxaguar suavemente com água. Limpar suavemente a lâmina com papel absorvente. 3. Descolorir durante 1~2 minutos com álcool ácido. 4. Enxaguar suavemente com água (se o vermelho ainda for visível na superfície da amostra, adicionar novamente álcool ácido até o vermelho estar completamente descolorido. Em seguida, continuar a enxaguar com água). 5. Aplicar azul de metileno durante 20~30 segundos. Enxaguar suavemente com água. 6. Diferenciar em etanol a 95% durante 5 a 10 segundos. 7. Desidratar em etanol absoluto e limpar com xileno. Montar com meios de montagem. 8. Em alternativa, a etapa de desidratação acima referida pode ser substituída por secagem ao ar. 9. Examinar a lâmina pronta sob uma lente de imersão em óleo.