O ferrocianeto de potássio destina-se a corar a hemossiderina e a diferenciar a hemossiderina de outros pigmentos.
Princípio:
O ferro dos tecidos (no estado férrico) pode ser libertado das proteínas com ácido clorídrico diluído. Em seguida, reage com ferrocianeto de potássio para formar ferrocianeto férrico azul, o que é conhecido como a reação do azul da Prússia.
Métodos:
1. Fixar os tecidos em formaldeído neutro tamponado a 10%. Desidratar da forma habitual e incorporar.
2. Desparafinizar o tecido em água destilada. Lavar novamente com água destilada.
3. Misturar um volume igual de ferrocianeto de potássio a 2% e ácido clorídrico a 2%. Deixar cair a mistura sobre as lâminas durante 20~30 minutos. Lavar com água destilada.
4. Colocar uma coloração de contraste na solução Nuclear Fast Red durante 5 a 10 minutos e lavar brevemente com água destilada.
5. Desidratar em etanol a 95% e etanol absoluto, limpar em xileno e montar com meios de montagem.
Precaução:
1. Os tecidos devem ser fixados com formaldeído neutro tamponado. Se for utilizado formaldeído normal, o tecido deve ser fixado durante um período mais curto antes de ser incorporado. Os tecidos que são fixados em formaldeído comum durante muito tempo reagem mal. Evitar a utilização de fixadores que contenham cromato.
2. É preferível utilizar ácido clorídrico de qualidade analítica ou superior, uma vez que o ácido clorídrico de qualidade inferior contém normalmente impurezas de ferro que podem dar origem a falsos positivos.
3. Todos os recipientes/utensílios utilizados durante todo o procedimento devem estar limpos. Evitar a utilização de utensílios de ferro.
4. Nos passos anteriores à reação do ferro, enxaguar apenas com água destilada para evitar que o ferro presente na água da torneira se misture com o sal de cálcio presente nos tecidos, o que conduz a falsos positivos.
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