O vermelho de óleo destina-se à coloração de gorduras neutras.
Princípio:
Pensa-se que a coloração dos lípidos está relacionada com as propriedades físicas da solução ou da adsorção. Os corantes apresentam uma maior solubilidade nas substâncias lipídicas do tecido congelado do que nos solventes originais. Assim, durante a coloração, os corantes migram para os lípidos a partir dos solventes orgânicos, resultando na coloração dos lípidos.
Métodos:
1. Cortar tecido congelado com uma espessura de 6~10μm, enxaguar brevemente em água destilada.
2. Enxaguar o tecido em isopropanol a 60% durante 20~30 segundos.
3. Preparar a solução de trabalho Oil Red O com 6 mL de solução-mãe Oil Red O e 4 mL de água desionizada. Misturar bem e deixar repousar durante 10 minutos. Corar na solução de trabalho Oil Red O durante 5 a 10 minutos.
4. Enxaguar em isopropanol a 60% durante alguns segundos para remover o excesso de corante. Enxaguar em água destilada.
5. Corar os núcleos com solução de hematoxilina de Mayer.
6. Diferenciar as lâminas em ácido clorídrico a 1% durante alguns segundos.
7. Azular em água da torneira ou em solução diluída de carbonato de lítio durante 10 minutos. Remover o excesso de água à volta.
8. Fixar com arabinano ou geleia de glicerina.
Precaução:
1. Para visualizar os lípidos, corar tecido congelado em vez de tecido em parafina, uma vez que os lípidos são facilmente solúveis em solventes orgânicos.
2. O tecido congelado utilizado para a coloração de lípidos não deve ser demasiado fino. Caso contrário, o conteúdo lipídico perder-se-ia.
3. O tempo de contracoloração em hematoxilina de Mayer não deve ser demasiado longo.
4. A coloração não vai durar muito tempo, por isso observe e tire fotografias o mais rapidamente possível.
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