HTRF Human IFN-β Detection Kit は、細胞上清中のヒト IFN-β を検出・定量するために設計されたイムノアッセイです。
概要
I型インターフェロンであるインターフェロンα(IFN-α)およびインターフェロンβ(IFN-β)は、ウイルス感染に対する自然免疫反応において重要な役割を果たしている。IFN-βは、線維芽細胞、マクロファージ、樹状細胞、および内膜細胞によって産生される。IFN-β遺伝子の発現は、IRF-3、c-Jun/ATF-2、およびNF-κBのような転写因子によって、Toll様受容体のようなパターン認識受容体の下流で制御される。特に、IFN-βはcGas-cGAMP-STING経路活性化の主要な機能的読み出し因子である。分泌されると、IFN-βはIFNAR1/IFNAR2受容体複合体に結合し活性化されるが、この複合体はSTAT1/2転写因子に依存している。リン酸化されたSTAT1/2は、抗ウイルス遺伝子発現の誘導につながる。
血清サンプルの評価には、しばしば感度の向上が必要とされる。場合によっては、AlphaLISAアッセイは、血清中または血漿中の低濃度の分析物を検出するのに十分な感度を有することがある。
アッセイ原理
細胞上清、検体または標準物質をアッセイプレートに直接分注し、HTRF® 試薬で検出します(20 µLの384ウェル低容量白色プレートまたはRevvity低容量96ウェルプレート)。HTRFドナーとアクセプターで標識された抗体はあらかじめ混合され、1回の分注で添加されるため、アッセイ手順がさらに効率化されます。各添加量を比例してサイズ変更するだけで、1536ウェルフォーマットまでアッセイを実行できます。
アッセイデータ解析
ELISA標準曲線のフィッティングには、4パラメータ・ロジスティック(4PL)曲線が一般的に推奨されています。
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