光学顕微鏡用の細胞組織学的サンプル調製用製品。
用途
ヒト骨格筋の8ミクロンの凍結切片。酸性ホスファターゼの酵素活性を示す。
酸性ホスファターゼはマクロファージとリソソームに存在し、壊死と再生を識別する。
原理 結果 ナフトール酸性リン酸は、組織内に存在する酸性ホスファターゼによって加水分解され、ナフトール誘導体が生成される。ナフトール誘導体は不安定なジアゾニウム塩であるヘキサゾニウムパラロサニリンとカップリングし、酵素活性部位を示す赤色アゾ色素を生成する。
方法
1) 試薬を室温に戻してから操作を開始する。
2) 酸性ホスファターゼ固定液(Bio-Optica code 30-30120)で10分間切開する。
3) 自然乾燥、10分
4) インキュベート液の調製: - 試薬Bを試薬Cに加える。 - 試薬Dに試薬Bを加え、5~10秒間振とうする。 - B+C溶液をA+D溶液に加える。5~10秒間振とうする。
5) 切片を37℃で45分間インキュベートする。
6)蒸留水で10分間リンスする。
7) メチルグリーン(Bio-Opticaコード30-30119)、5分
8)蒸留水でリンス
9) 水性マウント媒体にマウントする。または、アルコールからキシレンまで急速に脱水し、樹脂製のマウント媒体にマウントする。
酸性フォスファターゼ酵素活性陽性:赤色
結果
背景と核:緑
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