PASヘパチン染色はヘパチン染色を目的とする。組織を過ヨウ素酸で酸化し、無色のフクシンを加えて発色させる。主にポリオースの検査に用いられる。真菌や細菌にも陽性反応を示す。
原理
過ヨウ素酸はポリオースの炭素結合を破壊する酸化剤である。まず、組織を過ヨウ素酸溶液中で酸化し、組織ポリオース中のグリコール基またはアンモニア性水酸基の炭素結合を切断し、アルデヒド化合物を生成する。その後、遊離したアルデヒドが無色のフクシンと反応し、新しい赤紫色の化合物を形成する。
方法
1.切片を脱イオン水に脱パラフィンする。
2.蒸留水で1~2分間すすぐ。
3.切片を0.5%過ヨウ素酸で10分間酸化する。
4.蒸留水で十分にすすぎ、吸水紙で切片を乾燥させる。
5.Schiff試薬(無色Fucshin溶液)で10〜15分間染色する。
6.水道水で10分間洗浄する。
7.ヘマトキシリンで核を1~2分間染色する。
8.95%アルコールと100%アルコールで脱水し、キシレンで透明にする。
9.マウントメディアでマウントする。
注意
1.無色フクシン溶液は冷蔵庫で保管し、使用前に室温に戻してください。使用後は元のボトルに戻し、冷蔵庫で保管する。以上の手順で、バラ色になるまで数回再使用することができる。
2.無色フクシン液の染色時間は室温によって異なる。夏場は通常10分で十分だが、冬場は20分まで延長する必要がある。
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