染料試薬キット BA4090

微生物学用結核菌

本キットは、WHOが推奨するZiehl-Neelsen法に基づいており、結核菌などの酸菌の検出を目的とした化学染色です。 原理 結核菌やMycobacterium lepraeなどの抗酸菌は、細胞壁にリポイドカプセルを持つため染色が困難である。しかし、リポイドカプセルをカルボルフシンのような増強染料で染色すると、新たに形成された化合物は酸アルコールによる脱色に抵抗し、染色された元の色（赤色）を保持するため、カウンターブルーの染色剤をまだ吸着している他の微生物と容易に区別することができる。フェノールは媒染剤であり、染色性を向上させることができる。 方法 1.組織を脱パラフィンし、カルボルフクシン（Carbolfuchsin）を加え、小さな炎で加熱し、5~10分間蒸し染色する。蒸発乾固や沸騰は避ける。 2.冷却後、軽く水で洗い流す。ビブルペーパーでスライドを軽く拭き取る。 3.酸性アルコールで1～2分間脱色する。 4.軽く水ですすぐ（試料の表面にまだ赤が残っている場合は、赤が完全に脱色されるまで再度酸性アルコールを加える。その後、水洗いを続ける）。 5.メチレンブルーを20～30秒間塗布する。軽く水で洗い流す。 6.95%エタノールで5~10秒濃縮する。 7.絶対エタノールで脱水し、キシレンで透明にする。マウントメディアでマウントする。 8.あるいは、上記の脱水工程を風乾に置き換えることもできる。 9.完成したスライドを油浸レンズで観察する。