コラーゲン線維の染色には、通常ヴァン・ギーソン染色が用いられる。コラーゲン線維は3つの線維の中で最も広く、最も多く分布している。
原理
酸性フクシンおよびピクリン酸のコラーゲン線維および筋線維に対する親和性の違いに基づく二重染色。コラーゲン線維は酸フクシンと結合して赤色からピンク色になり、筋線維はピクリン酸と結合して黄色に見える。
方法
1.組織を10%ホルムアルデヒドで固定し、通常の方法で水和し、包埋する。
2.組織を水中で脱パラフィンする。
3.Weigert鉄ヘマトキシリンで5~10分間染色する。水洗する。
4.1%塩酸エタノールで迅速に鑑別する。流水で数分間すすぐ。
5.Van Gieson溶液で1~2分間染色する。
6.ステインを除去し、95%エタノールで数秒間手早く分化させる。
7.絶対エタノールで脱水し、キシレンで透明にする。マウントメディアでマウントする。
注意
1.ワイガート鉄ヘマトキシリン溶液は、使用前にA液とB液を等量混合して調製する。事前に混合しないと酸化沈殿が生じ、染色性が失われる。
2.VG染色後は95%エタノールで速やかに組織を鑑別する。
3.酸性フクシンは水に溶けるので、VG溶液で染色した後は水洗しない。代わりに95%エタノールを直接加えて鑑別し、絶対エタノールで脱水する。そうしないと、VG染色の色が弱くなったり変色したりする。
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