オイルレッドは中性脂肪の染色用。
原理
脂質の染色は、溶液の物理的性質または吸着に関係すると考えられている。染料は凍結組織の脂質物質中では、元の溶媒中よりも高い溶解性を示す。そのため、染色中、色素は有機溶媒から脂質に移行し、脂質染色が生じる。
方法
1.凍結組織を6~10μmの厚さに切断し、蒸留水で短時間洗浄する。
2.組織を60%イソプロパノールで20~30秒間すすぐ。
3.オイルレッドO原液6mLと脱イオン水4mLでオイルレッドO作業溶液を調製する。よく混合し、10分間静置する。オイルレッドO作業溶液で5~10分間染色する。
4.60%イソプロパノールで数秒間すすぎ、余分な染色を除去する。蒸留水ですすぐ。
5.メイヤー・ヘマトキシリン溶液で核を染色する。
6.スライドを1%塩酸で数秒間、分化させる。
7.水道水または希釈炭酸リチウム溶液で10分間青色化する。周囲の余分な水分を取り除く。
8.アラビナンまたはグリセリンゼリーでマウントする。
注意
1.脂質は有機溶媒に溶けやすいので、脂質を表示するにはパラフィン組織ではなく凍結組織を染色する。
2.脂質染色に使用する凍結組織は、あまり薄すぎない方がよい。さもないと、脂質の含有量が失われてしまう。
3.メイヤー・ヘマトキシリンでの対染色時間は長すぎない方がよい。
4.染色はあまり長く続かないので、できるだけ早く観察し、写真を撮ること。
---