アルシアンブルー(pH2.5)染色は、酸性粘液物質の染色、粘液上皮腫および腫瘍中の粘液物質の同定、ならびにクリプトコッカス・ネオフォルマンス莢膜の染色を目的としている。
原理
アルシアンブルーは、酸性粘液物質を検出する最も特異的な染色剤である。この陰イオン色素は酸基と電気価結合を形成する。アルシアンブルーは、様々なpHで異なる粘液物質を分離・同定するのに使用できる。pH1ではスルホン基(OSO3H)が染まり、pH2.5ではカルボキシル基がよく染まる。クリプトコッカス・ネオフォルマンスの莢膜は粘液物質からなり、アルシアンブルーで青く染色できる。他のベト病菌とその莢膜は染色できない。
方法
1.組織を10%ホルムアルデヒドで固定する。通常の方法で脱水し、包埋する。
2.切片を脱イオン水に脱パラフィンする。
3.アルシアンブルー溶液に10~20分間浸し、水で簡単にすすぐ。
4.核ファストレッド溶液で5~10分間カウンターステインし、水で簡単にすすぐ。
5.通常の方法で脱水し、透明にする。マウントメディアでマウントする。
注意
1.アルシアンブルー溶液は、pHを2.5に保つために3%の酢酸を含む。チモールは防カビ剤として使用する。アルシアンブルー溶液およびニュークリアファストレッド溶液は調製後4℃で保存する。
2.アルシアンブルー溶液は強い染色で色も安定している。長時間の染色でも過汚染の心配はありません。
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