フェロシアン化カリウムは、ヘモジデリンを染色し、ヘモジデリンと他の色素を区別するためのものである。
原理
希塩酸でタンパク質から組織の鉄(第二鉄の状態)を遊離させることができます。その後、フェロシアン化カリウムと反応し、プルシアンブルー反応として知られる青色フェロシアン化鉄を形成する。
方法
1.組織を10%中性緩衝ホルムアルデヒドで固定する。通常の方法で脱水し、包埋する。
2.組織を蒸留水で脱パラフィンする。蒸留水で再度洗浄する。
3.等量の2%フェロシアン化カリウムと2%塩酸を混ぜる。この混合液をスライドに20~30分間滴下する。蒸留水ですすぐ。
4.核ファストレッド溶液で5~10分間カウンターステインし、蒸留水で短時間すすぐ。
5.95%エタノールおよび絶対エタノールで脱水し、キシレンで透明にし、マウント用メディウムでマウントする。
注意
1.組織は中性緩衝ホルムアルデヒドで固定する。通常のホルムアルデヒドを使用する場合は、包埋前に組織を短時間固定すべきである。通常のホルムアルデヒドで長時間固定した組織は、反応が悪い。クロム酸塩を含む固定剤の使用は避ける。
2.低グレードの塩酸は一般的に鉄不純物を含み、偽陽性を引き起こす可能性があるため、分析グレード以上の塩酸が望ましい。
3.手順全体を通して使用する容器や器具はすべて清潔なものを使用する。鉄製器具の使用は避ける。
4.鉄反応前のステップでは、水道水中の鉄が組織中のカルシウム塩と化合して偽陽性になるのを防ぐため、蒸留水のみですすいでください。
---